The procedures listed below for tis

The procedures listed below for tissue homogenates and cell lysates will result in assaying
total SOD activity (cytosolic and mitochondrial). To separate the two enzymes, centrifuge
the 1,500 x g supernatant at 10,000 x g for 15 minutes at 4°C. The resulting 10,000 x g
supernatant will contain cytosolic SOD and the pellet will contain mitochondrial SOD.8
Homogenize the mitochondrial pellet in cold buffer (i.e., 20 mM Hepes, pH 7.2, containing
1 mM EGTA, 210 mM mannitol, and 70 mM sucrose). If not assaying on the same day,
freeze the samples at -80°C. The samples will be stable for at least one month.
The addition of 1-3 mM potassium cyanide to the assay will inhibit both Cu/Zn-SOD and
extracellular SOD, resulting in the detection of only Mn-SOD activity.3,9
Samples can be assayed in the absence of Xanthine Oxidase to generate a sample
background. This sample background absorbance should be subtracted from the sample
absorbance generated in the presence of Xanthine Oxidase thus correcting for non-SOD
generated absorbance.

결과 (한국어) 1:

조직 homogenates와 세포 lysates에 대 한 아래 나열 된 절차 시 금 귀 착될 것 이다총 잔디 활동 (cytosolic와 미토 콘 드리 아)입니다. 두 효소를 분리, centrifuge4 ° c.에 15 분 동안 10000 x g에서 g 상쾌한 x 1500 결과 10000 g x상쾌한 cytosolic 떼 포함 됩니다. 및 펠 릿 미토 콘 드리 아 SOD.8 포함 됩니다.균질 찬 버퍼 (즉, 20 mM Hepes, pH 7.2, 포함 된 미토 콘 드리 아 펠 릿1 m m EGTA, 210 m m 마 니 톨, 및 70 m m 자당). 같은 날에 시 금 하지 하는 경우-80 ° c.에 샘플을 동결 샘플 적어도 한 달 동안 안정 되어 있을 것입니다.분석 결과를 1-3 mM 칼륨 청산가 리의 추가 모두 Cu/Zn-잔디 억제 및extracellular 떼, 미네소타-잔디 activity.3,9만의 검색 결과샘플 샘플을 생성 하려면 세 산화 효소의 부재에서 분석 될 수 있다배경입니다. 이 샘플 배경 흡 광도 샘플에서 공제 해야따라서 비-잔디에 대 한 수정 세 산화 효소의 생성 하는 흡 광도흡 광도 생성.

결과 (한국어) 2:

조직 균질 및 세포 용 해물을 위해 아래의 절차는 시금 발생합니다
총 SOD 활동 (세포질과 미토콘드리아를). 두 효소를 분리, 원심 분리기
4 ℃에서 15 분 동안 10,000 XG에서 1,500 XG에 뜨는를. 그 결과 10,000 XG의
상층 액은 세포질 SOD를 포함하고 펠렛은 미토콘드리아 SOD.8이 포함됩니다
추위 버퍼의 미토콘드리아 펠릿을 균질화 (즉, 포함하는 20 mM 헤 페스, 산도 7.2,
1 mM의 EGTA, 210 mM의 만니톨, 70 MM의 자당). 같은 날 시금하지 않으면
-80 ° C에서 샘플을 동결. 샘플은 1 개월 이상 동안 안정 될 것이다.
검정 1-3 밀리미터 시안화 칼륨 첨가가 Cu를 / 아연-SOD 모두 억제한다
만 MN-SOD의 activity.3,9의 검출 결과, 세포 외 SOD를
샘플 샘플 생성하는 크 산틴 산화 효소의 부재하에 분석 할 수있는
배경. 이 샘플 배경 흡광도 샘플로부터 감산되어야
크 산틴 옥시다아제 따라서 비 SOD를 보정의 존재하에 생성 된 흡광도
흡광도를 생성.

결과 (한국어) 3:

다음 이 프로그램 호모지네이트 것이다, 단백질 측정
자꾸 활성 (시토솔, 사립체).따로 두 가지 효소, 원심기
1 x g 비녀 (g) 만 x 15 분 ° 때문에 4. x
비녀 (g) 만 것이다, 안에 완전 퇴출 포함 (8 - 라인.골고루 추운 버퍼 미토콘드리아 퇴출 (20 mm 사마귀, ph 7.2, 칼슘 머금고
1 mm, 210 mm 매니트, 설탕 70 mm).아니, 시금 이날
냉동 샘플 - 80 ° 안정될 것이다. 이 샘플 적어도 한 달.
추가 밀리미터 청산가리 모두 검색 억제할 수 - 아연 (),
동포,검색 아니라 때문에 mn 활성. 3,
샘플 검사 수 없는 크산틴 생성 샘플
배경.반드시 이 샘플 배경 흡수 빼면 생기는 샘플
흡수 앞에서 크산틴 이렇게 수정 (
생성 흡수 없다.